(812)385-11-95 Адреса клиникПосмотреть на карте
Меню
Сайта
Главная / Статьи об исследованиях / Технология ПЦР в режиме реального времени (Real-time PCR)

Технология ПЦР в режиме реального времени (Real-time PCR)

В современной лабораторной диагностике ИППП все большую роль играют молекулярно-биологические методы, и в первую очередь метод ПЦР. Высокая чувствительность и специфичность ПЦР, а также ряд других характеристик в перспективе дают возможность рассматривать его как метод выбора при диагностике большинства инфекций.

Однако существенные сложности на пути широкого внедрения метода ПЦР в практику медико-диагностических лабораторий создает высокий риск контаминации (загрязнения) продуктами ПЦР при проведении определения методом электрофореза. Извлечение продуктов ПЦР из пробирок для проведения детекции создает риск загрязнения реактивов или клинического материала, вызывающей появление ложно-положительных результатов и других артефактов ПЦР-анализа. Поэтому для обеспечения правильной работы требуется выполнение строгих специальных требований к организации лаборатории и работы персонала.

В последние годы началось применение гибридизационно-флуоресцентного методов определения продуктов ПЦР. Данная технология основана на использовании флуоресцентно-меченых олигонуклеотидных зондов и позволяет оценивать накопление специфического продукта амплификации (накопления ДНК, РНК) по увеличению уровня флуоресцентного сигнала. Возрастание флуоресценции обусловлено гибридизацией олигонуклеотидного зонда с комплементарным ему участком ДНК-мишени. При этом избирательное действие зонда дополнительно обеспечивает специфичность. Метод позволяет регистрировать накопление специфического продукта амплификации либо непосредственно в процессе ПЦР («ПЦР в режиме реального времени», «Real-time PCR»), либо после окончания реакции («анализ флуоресценции в конечной точке», «End-point»). Причем, в обоих случаях анализ результатов ПЦР осуществляется без извлечения продуктов реакции из пробирок. Это позволяет свести к минимуму риск контаминации.

— сведение к минимуму риска контаминации и связанных с ней ложно-положительных результатов и артефактов ПЦР; — автоматический анализ результатов, стандартизация результатов, исключение субъективности интерпретации; — возможность количественной оценки содержания ДНК/РНК в клиническом образце.

В настоящее время в нашей лаборатории проводится анализ ПЦР в режиме реального времени («Real-time PCR») на следующие инфекции:
- Chlamydia trachomatis;
- Gardnerella vaginalis;
- Ureaplasma urealyticum;
- Herpes symplex virus I, II;
- Mycoplasma hominis;
- Candida albicans;
- Mycoplasma genitalium;
- Cytomegalovirus (CMV) кач. и колич.;
- Neisseria gonorrhoeae;
- EBV-скрин-титр;
- Вируса папилломы человека высокого канцерогенного риска (ВПЧ ВКР): HPV–скрининг (16,18,31,33,35,39,45,51,52,56,58,59 типы);
- Вирус гепатита В (HBV) – качественный и количественный анализ;
- Вирус гепатита С (HCV) – качественный и количественный анализ.